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对于样本的完美质控,我们是认真的

版权所有,转载请联系基因市场部
2021-02-04

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样本质控的重要性

为什么要对样本进行质控?

     分子生物学实验流程一般是对样本(组织/细胞)进行预处理后提取DNA、RNA、蛋白质等生物大分子用于下游的深度分析,比如qPCR、测序、微阵列芯片、蛋白质谱等。对生物大分子的浓度、纯度、完整性、污染物残留等进行质控对下游检测数据的准确性、客观性和重复性至关重要。比如:qPCR时,DNA模板浓度过高或过低都会影响PCR扩增效率,导致得出不够准确的定量结果;模板中残留较多的苯酚会影响PCR酶的活性甚至使酶失去活性;进行转染实验时,质粒的浓度与质量未经质控会影响细胞转染效率等。因此,对生物大分子的有效质控势在必行。

对于样本质控,你怎样做?

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Acclaro源于意大利语,寓意为"to make clear",Acclaro样品智能检测技术蕴含三层涵义:

1.污染物鉴定:使用强大的数据分析算法鉴定样品中的污染物。

2.机载技术支持:提供具有信息提示和指导性故障排除的技术支持。

3.上样液柱完整性监测:嵌入式传感器和数字图像分析,监测液柱完整性,识别液柱中是否含有气泡。

               样本检测

                   进入

               分析时代!!!

一次检测,全面分析

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Acclaro样品智能检测技术使用精细的数学算法来分析光谱数据,自动鉴定出样品中的污染物类型。

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     当检测到纯度不符合要求的样本时,软件会自动报警提示,提供可能的污染物信息,并对样本浓度进行矫正,在检测界面上可以同时查看多个样本的信息。如下图所示,Acclaro用黄色三角标识符合标记了第四号dsDNA样本可能存在污染物,提醒样本存在污染。

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点击黄色三角标识,可以看到样品中存在蛋白时,导致A260值增大(蓝色光谱),从而dsDNA浓度比实际的高,污染物分析技术可将蛋白的含量(橙色光谱)从原始数据中扣除,从而得到矫正后正确的DNA浓度(绿色光谱)。

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    酚氯仿法是提取核酸的常用方法,苯酚的残留会使蛋白质变性,可能会导致下游实验的失败。

    在225ng/μL的dsDNA标准品中分别掺入不同量的苯酚,制成9个样品:传统方法(蓝色)NanoDrop One(绿色)测试结果:

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 NanoDrop One:

·  当苯酚含量低至38ppm时, NanoDrop One鉴定出了苯酚的污染, 并且对核酸浓度进行了矫正。

传统方法:

·  当苯酚浓度达到1200ppm时,A260/A280才处于不可接受范围内。

传统方法给出的浓度值(蓝色)几乎是真实核酸浓度(绿色)4倍!

   因此,相较于传统的检测方法,NanoDrop One Acclaro样品智能检测技术能更加灵敏地鉴定出样品中残留的污染物给出真实样品浓度

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实时的故障排除指南和技术支持。

点击警报解决按钮查找Acclaro支持工具。


     基于NanoDrop技术支持最常收到的问题:

 1.介绍个别问题的常见原因,推荐解决方案

 2.通过support tools提供故障排除指南

 3.提供样品质量信息和排除故障指南

 4.软件内含短视频动画培训


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了解样品纯度比值超出可接受范围的原因及推荐的解决方案。

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通过内置的传感器对样品形成的液柱进行数码成像,通过图像分析液柱是否有异常。

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液柱损坏: 

取消检测

样品中有气泡:

液柱中的气泡会散射光,并提高340 nm基线校正值;光散射会影响吸光度测量 ,影响光谱图的质量,以及浓度计算的准确性,建议重新上样检测。

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基因有限公司为NanoDrop系列产品中国区独家代理商。公司的宗旨是“基因燃亮生命·生物技术连接世界”,专业的团队为各大科研机构提供安装培训,技术支持,应用培训与售后维护一条龙服务,赢得客户的一致好评与信任。如果您想试用我们的仪器,请扫描下方二维码联系我们吧。

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